热脱附气相色谱-质谱联用技术分析铜绿假单胞菌体外生物膜挥发性代谢产物。
囊性纤维化( Cystic fibrosis，CF )是一种常染色体隐性遗传病，可导致气道黏液增厚。这些条件有利于多菌性感染，如慢性肺部感染，其中铜绿假单胞菌( P . aeruginosa )是CF患者生命末期定植CF肺部的主要致病菌。这项体外研究使用铜绿假单胞菌生物膜模型，在部分囊性纤维化条件下，取样挥发性的胞外代谢产物。气体采样采用薄膜微萃取( TFME )和商用聚二甲基硅氧烷( PDMS )薄膜，负载薄膜分析采用气相色谱-四极杆质谱-热脱附( TD-GC-qMS )联用技术。为此，采用热重-大气压光离子化qMS ( TG- APPI-qMS )联用技术对两种市售薄膜进行了均一性和温度稳定性表征。采用本研究建立的方法对所选薄膜进行清洗。TD-GC-qMS法成功用于已知铜绿假单胞菌产生的挥发性代谢产物的标准。该方法在低纳米范围( 0.5 n M和1.5 n M )对中、低极性化合物的检测和定量均达到了极限。最后将所建立的方法应用于好氧和厌氧条件下铜绿假单胞菌DSM 50071生物膜产生的胞外挥发性代谢产物的研究。综上所述，两种条件下均能检测到11种代谢物。此外，本研究还表明，不同的氧气条件(有氧和无氧)会产生不同的胞外挥发性代谢产物。特定代谢物，如1 -十一烯(有氧)和2 -十一酮(无氧)，可以被鉴定。该结果很有前途，因为生物膜模型可能适用于临床条件下铜绿假单胞菌的鉴定。