秀丽隐杆线虫肠道细菌负荷动态及吸收的invo微流体研究
秀丽隐杆线虫( Caenorhabditiselegans,C .秀丽隐杆线虫)已成为研究宿主-微生物相互作用和与人类病原体相关的细菌感染的重要模型。因此,评估被摄食细菌在蠕虫肠道内的命运是非常有兴趣的,特别是在正常的细菌消化或被病原体定植肠道方面。在这里,我们报告了对线虫肠道细菌的体内研究。我们利用一种聚二甲基硅氧烷( PDMS )微流控装置,能够在生理条件下对成年蠕虫进行被动固定化。利用表达pH敏感或pH不敏感荧光报告基因的非致病性大肠杆菌( Escherichia coli,E.coli )和荧光标记的不可消化微珠进行了不同的检测。通过时移成像方便地监测虫体肠道内细菌负荷的动态荧光模式。观察到由于肠道蠕动活性引起的细菌负荷的循环运动,并通过对虫体肠道的高分辨率荧光成像来表征大肠杆菌的生化消化。我们可以区分个体完整的细菌和与能被消化的破坏细菌相关的弥散信号。从弥散荧光信号的衰减情况看,我们确定了一个消化时间常数为14±4s。为了评估利用该平台进行感染检测的可能性,我们将固定化线虫饲喂致病性海洋分枝杆菌( Mycobacterium marinum,M. marinum )。我们分析了细菌在N2蠕虫肠道中的命运和积累以及在一个hsp-6::gfp突变体中线粒体的应激反应。