增殖调节

背景资料\n对于不同类型的贴壁细胞，了解培养基质刚度的影响已有几项研究。人们普遍认为，细胞增殖、铺展和灶性粘连随着基质刚度的提高而增加。然而，目前尚不清楚的是，这种细胞行为是否可能通过在软基上培养那些原先选择或在刚性表面上诱导的细胞系来逆转。\n结果\n在此，我们研究了基质柔软性对高增殖肝C9细胞系增殖、粘附和形态的影响。我们分别在10和200 k Pa范围内用两种不同弹性模量制备的软硬聚二甲基硅氧烷( PDMS )基底上培养C9细胞。在刚度较低的底物上观察到较低的细胞增殖而不影响细胞活力。在软PDMS上，C9细胞的增殖率随细胞外生长调节激酶( ERK )磷酸化而降低。尽管该细胞系已被描述为肝脏上皮细胞，但我们的特性证明，C9细胞的起源并不确定，尽管很明显是上皮性的，有几种肝细胞的标志表达。令人惊讶的是，连续传代的C9细胞在柔软的PDMS上并没有改变这种间充质表型，在柔软的基底上培养细胞时波形蛋白的表达并没有减少，即使在柔软的PDMS上传代数次后，ERK磷酸化水平最终增加，再次触发细胞增殖增加。\n结论与意义\n本研究表明，与PDMS上的其他类型细胞一样，C9细胞在软基底上的暴露促进了细胞增殖率的降低，而长时间的暴露使细胞在多次传代后适应软基底，重新激活增殖。在此现象期间，随着细胞增殖率的增加，训练细胞的形态和表型发生了改变，这与细胞培养短期内观察到的效果相反。

对于不同类型的贴壁细胞，了解培养基质刚度的影响已有几项研究。人们普遍认为，细胞增殖、铺展和灶性粘连随着基质刚度的提高而增加。然而，目前尚不清楚的是，这种细胞行为是否可能通过在软基上培养那些原先选择或原生质在坚硬表面的细胞系得以逆转。我们分别在10和200 k Pa范围内用两种不同弹性模量制备的软硬聚二甲基硅氧烷( PDMS )基底上培养C9细胞。在刚度较低的底物上观察到较低的细胞增殖而不影响细胞活力。在软PDMS上，C9细胞系的增殖率随细胞外生长调节激酶( ERK )磷酸化而降低。尽管该细胞系已被描述为肝脏上皮细胞，但我们的特性证明，C9细胞的起源并不确定，尽管很明显是上皮性的，有几种肝细胞的标志表达。令人惊讶的是，C9细胞在软PDMS上连续传代并没有改变这种间充质表型，在软基底上培养细胞时波形蛋白的表达并没有降低，尽管在软PDMS上传代数次后ERK磷酸化水平最终升高，再次引发细胞增殖的增加，本研究表明，C9细胞在软基底上的暴露促进了细胞增殖率的降低，其他类型细胞在PDMS上的报道也是如此，而长时间的暴露使细胞经过多次传代训练后适应柔软，重新激活增殖。在此现象期间，随着细胞增殖率的增加，训练细胞的形态和表型发生了改变，这与细胞培养短期内观察到的效果相反。与之前的报道相反，在这些实验过程中没有观察到细胞死亡，放弃了一种细胞选择机制，提示软细胞适应在C9细胞中可能会受到时间限制。