优化聚四氟乙烯( PTFE )涂层在PDMS表面抑制疏水分子吸收提高光学检测灵敏度
聚二甲基硅氧烷( PDMS )是一种广泛应用于微流控芯片制造和成型的聚合物。PDMS的多孔基体结构使得包括一些荧光染料在内的小疏水分子易于被PDMS吸收,产生高荧光背景信号,从而显著降低了光学检测灵敏度。这使得用PDMS器件准确检测样品中的荧光信号变得困难。在此,我们利用聚四氟乙烯( PTFE )来抑制PDMS上疏水性小分子的吸收。采用尼罗红分析抑制效果,3 %和6 % PTFE涂层的吸收荧光强度( 7.7±1.0和6.6±0.2 )比1 %和2 % PTFE涂层的结果( 17.2±0.5和15.4±0.5 )低2倍。与对照( 55.3±1.6 )相比,背景荧光强度降低了7倍。进一步,我们利用能够在培养过程中局部刺激细胞的PDMS生物反应器对优化的PTFE涂层条件进行了验证,并利用莱茵衣藻CC-125对其产脂量进行了定量分析。由于3 %和6 % PTFE涂层之间差异不显著,故选择3 % PTFE涂层为最佳浓度。细胞内脂肪含量在生物反应器内成功地被尼罗红染色,3 % PTFE涂层成功地将本底荧光噪声降到最低,允许PDMS生物反应器内检测到与芯片外可比的强光脂信号,相差不到1 %。