体外培养基质对肺泡细胞形态和功能的影响。

ty10086 提交于 周三, 08/25/2021 - 16:14
文章英文标题
Influence of Culture Substrates on Morphology and Function of Pulmonary Alveolar Cells In Vitro.
正文
细胞的微环境已被证明对细胞行为产生影响。特别是基质-细胞相互作用强烈影响细胞形态和功能。本研究旨在分析不同培养基质材料对肺上皮腺癌( A549 )细胞表型和功能特性的影响。将A549细胞接种于两种不同的生物相容性、市售的基质上:作为细胞培养板对照的聚酯玻片( Thermanox ™ Coverskis )和聚二甲基硅氧烷膜( PDMS,Elastosil® Film )。两种底物均影响细胞形态和肌动蛋白细胞骨架组织。进一步,在聚酯基底上培养的A549细胞中,Yes相关蛋白( YAP )及其转录共激活因子PDZ结合基序( TAZ )被转位到细胞核中,但在PDMS基底上的细胞中仍多保留胞浆。通过SEM分析,我们观察到生长在Elastosil®膜上的细胞保持肺泡Ⅱ型细胞形态。表面活性剂-C免疫荧光染色显示,表面活性剂-C在Elastosil®膜上培养的细胞中高表达,而在Thermanox ™盖玻片上培养的细胞中不表达。生长在Elastosil®膜上的A549细胞的形态和功能显示肺泡上皮Ⅱ型表型的保留,而生长在常规塑料基质上的A549细胞获得肺泡Ⅰ型表型。
文章内容(英文)
Cell's microenvironment has been shown to exert influence on cell behavior. In particular, matrix-cell interactions strongly impact cell morphology and function. The purpose of this study was to analyze the influence of different culture substrate materials on phenotype and functional properties of lung epithelial adenocarcinoma (A549) cells. A549 cells were seeded onto two different biocompatible, commercially available substrates: a polyester coverslip (Thermanox™ Coverslips), that was used as cell culture plate control, and a polydimethylsiloxane membrane (PDMS, Elastosil® Film) investigated in this study as alternative material for A549 cells culture. The two substrates influenced cell morphology and the actin cytoskeleton organization. Further, the Yes-associated protein (YAP) and its transcriptional coactivator PDZ-binding motif (TAZ) were translocated to the nucleus in A549 cells cultured on polyester substrate, yet it remained mostly cytosolic in cells on PDMS substrate. By SEM analysis, we observed that cells grown on Elastosil® Film maintained an alveolar Type II cell morphology. Immunofluorescence staining for surfactant-C revealing a high expression of surfactant-C in cells cultured on Elastosil® Film, but not in cells cultured on Thermanox™ Coverslips. A549 cells grown onto Elastosil® Film exhibited morphology and functionality that suggest retainment of alveolar epithelial Type II phenotype, while A549 cells grown onto conventional plastic substrates acquired an alveolar Type I phenotype.
来源出处
Journal|[J]BiomoleculesVolume 11, Issue 5. 2021.
DOI
https://doi.org/10.3390/BIOM11050675

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